求助，cDNA稀释后qPCR平行性就变差甚至跑不出结果

目前在做qPCR扩增效率，最高浓度的cDNA结果很好，平行性也很不错，ct值在18左右，但是10倍稀释后的cDNA结果就很差了，不仅平行性差，而且稀释10^3或更多后经常跑不出结果来，按照未稀释组的结果这个浓度应该跑的出来才对。

我有qPCR实验经验，之前做没遇到过这种情况，所以目前不认为是我操作的问题（而且这次未稀释组的平行性良好）。有怀疑过是引物问题，但这次也使用了以前验证过的引物，结果还是不好，求助这可能是什么原因？

目前有一个猜想，那就是我这次提取RNA以及反转录用的DEPC水是开封很久的（虽然nanodrop测定RNA质量没问题），有没有可能是这个的影响？如果还解决不了的话准备所有试剂全换新的，从RNA提取开始重新做一遍看看。