有人遇到siRNA荧光团聚吗?
本人最近做siRNA转染,发现一个奇怪的现象,用lipofect3000转染FAM-NC后,细胞内荧光点很亮,但目的基因敲除效率不太理想,后面我用RFect V2做了同样的实验,荧光没有那么亮,但RT-qPCR检测出来目的基因的敲除效率却很高。百思不得其解,就请教了导师。导师说这是siRNA荧光团聚现象导致的。就是siRNA转染如果荧光很亮,说明转染进去的siRNA没有被充分释放,有团聚现象,因而目的基因敲除效率反而较低,有人遇到同样现象吗?
这是我用两款试剂做出来的荧光效果比较:

图1 Lipofect3000转染小核酸NC-FAM到HepG2细胞

图2 RFect V2转染小核酸NC-FAM到HepG2细胞
最后编辑于 02-21 · 浏览 212