RNA提取,260/230太高
求助园友们,最近提RNA260/230一直都很高,想问下有谁知道原因么?要怎么解决呢?
提RNA步骤:
1. 6孔板收细胞,每孔1mLTrizol(生工),放-80保存
2. 第二天一早取出样本,冰上解冻15min左右,每个EP管补充trizol至1mL,上下颠倒10次混匀
3. 冰上裂解10min
4. 加入200uL氯仿,上下颠倒10次混匀,冰上静置10min等待分层
5. 12000rpm,4度离心30min
6. 取400uL上清,加入400uL异丙醇,上下颠倒10次混匀,-20静置2小时
7. 12000rpm,4度离心30min,弃掉液体
8. 95%乙醇(超纯水+无水乙醇配置)每管加入1mL,12000rpm,4度离心3min,弃掉乙醇
9. 重复步骤8,离心时管子换个方向离
10. 空管离心3min,仔细吸弃乙醇,开盖15-20min,RNA变胶状透明时加入灭菌的超纯水稀释,测浓度
结果如下

感谢感谢啦~
最后编辑于 02-11 · 浏览 441