求助|做流式样品吸不上去是仪器问题还是样品问题
我的实验方案如下
①细胞准备∶细胞计数后,按1E5的数量铺板,培养6-8h,待其完全贴璧
②细菌准备∶取浊度为2的细菌1ml,离心后1mlPBS重悬,紫外下灭菌1h
③细菌细胞共培养∶将灭菌后的细菌按100∶1的量,用无抗培养基重悬,加入贴璧后的细胞培养皿中,共培养8-10h
④消化细胞∶去除培养基,用PBS洗涤2次,用胰酶消化细胞,然后离心去上清
⑤封闭∶用1ml的1%BSA,避光孵育10min.离心去上清
⑥加入抗体∶分别加入带直标荧光的抗体(FITC和APC),冰上孵育30min.离心去上清,PBS洗涤2次
⑦用500ul PBS重悬,上机做流式细胞仪检测
但是检测的老师说我的样品吸不上来,仪器流速也不对,他不知道是机器的原因还是样品的原因,有没有大佬帮我看看是不是我的方案有问题,或者仪器可能出现了什么问题吗
最后编辑于 01-02 · 浏览 911