蛋白纯化求助
我的蛋白N端his标签C端连着GFP(总大概100kDa),用pet28a表达,16℃ 250mM的IPTG诱导过夜(14h-16h左右)发现表达量比较低,但同时破碎离心后发现又都在沉淀里(估计是包涵体),我用带有8M尿素的buffer提取发现结合不上柱子,然后去跑WB杂his抗体又能正常发光,想请问一下有什么解决办法吗
最后编辑于 2024-12-26 · 浏览 154
我的蛋白N端his标签C端连着GFP(总大概100kDa),用pet28a表达,16℃ 250mM的IPTG诱导过夜(14h-16h左右)发现表达量比较低,但同时破碎离心后发现又都在沉淀里(估计是包涵体),我用带有8M尿素的buffer提取发现结合不上柱子,然后去跑WB杂his抗体又能正常发光,想请问一下有什么解决办法吗
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