求助分子克隆

我目前在做一个重组质粒的实验，我们实验室之前有一个已经构好的质粒，但是用的是CMV启动子，在人类细胞里表达效果不好，现在想要换成CAG启动子试一试，这个事情就交给了我来做。

我设计了一个双酶切酶连的实验来引入CAG启动子，载体片段酶切完是12500bp，插入片段大约是1.5kb，跑胶分离回收以后T4连接酶16℃连接过夜，转进DH5α，50μl菌加40ngdna，按照赛默飞给的protocol我是42度热激20s，然后加soc摇两小时涂板，但是不管怎么做就是不长菌，偶尔长几个也是假阳性，昨天按照老板的建议改用stabl2 30°C长两天，但今天一看control已经长出一点东西了，我的重组质粒板子还是干干净净

现在筛查发现以下问题：

1.插入片段没什么问题，但是载体酶切结果送去测序杂带很多，出现的假阳性结果都是载体片段的一部分，即在某一步载体片段再次破碎后恰好带有抗性的一部分环化，因此想要请教的第一个问题是这样一个大片段怎么回收比较好，双酶切应该是切出一个12500bp和一个420bp，送去测序也确实测出了主要就是我想要的片段

2.连接，转化是失败的重灾区，请问有没有什么好的建议，比如用T4以外的连接方法

谢谢各位！