过表达载体构建求助

请问大家在设计基因过表达引物时,有没有碰到过KOZAK序列“GCCACCATGG”中最后一位的“G”与基因CDS区ATG之后的密码子(A、T、C)冲突的情况。对于这个问题,我是插入一个氨基酸优先保证KOZAK序列的完整性,还是把G去掉(变成“GCCACCATG”)保证蛋白序列维持野生型合适呀?真的考虑了很久也不知道哪种处理更好,有没有大佬做实验验证过呀?救救牛马研究生吧
最后编辑于 2024-12-05 · 浏览 547
请问大家在设计基因过表达引物时,有没有碰到过KOZAK序列“GCCACCATGG”中最后一位的“G”与基因CDS区ATG之后的密码子(A、T、C)冲突的情况。对于这个问题,我是插入一个氨基酸优先保证KOZAK序列的完整性,还是把G去掉(变成“GCCACCATG”)保证蛋白序列维持野生型合适呀?真的考虑了很久也不知道哪种处理更好,有没有大佬做实验验证过呀?救救牛马研究生吧
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