冷冻脑切片制备过程中不同脱水方法的实验研究|Ibrain

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本研究旨在为大鼠脑冷冻切片的制备提供一种可推荐的方法，以减少和避免冰晶的产生。我们设计了5种不同的脱水溶液(方案1：15%、20%、30%蔗糖-磷酸缓冲盐水溶液脱水；方案2：20%蔗糖和30%蔗糖；方案3：30%蔗糖；方案4：10%、20%、30%蔗糖；方案5：用15%和30%蔗糖聚乙酸酯I将组织脱水直至其下沉至底部，然后放置在30%蔗糖聚乙酸酯II中)，以最大限度地减少冰晶的形成。采用尼氏染色法对不同方案冷冻切片进行细胞间密度和组织间隙距离的比较。方案1至方案5脱水过程所需时间分别为24、23、24、24、33 小时。尼氏染色显示，从方案1到方案5，细胞间密度逐渐降低，不同方案组织间隙距离呈分化和不规则。我们推荐采用方案4的脱水方法（将脑组织依次在10%、20%、30%蔗糖溶液中脱水，直至组织样本完全浸入该溶液中，再浸入下一个浓度的溶液中脱水）。

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