Wb这样是哪里出问题了？

这是那一步出问题了，我坐的是裸鼠移植瘤，第一幅图是nlrp3，剩下两张图是内参蛋白，为啥第一张蛋白不在一条线上，第二张最后蛋白颜色那么浅？求解答。