求助 免疫组化脱片问题

我做的是脊髓组织的免疫组化，用的是世泰的粘附载玻片，组织切片厚度为2.5um/3um/4um/5um，40度展片，60度烤片3h+，脱蜡前烤片30min，脱蜡至水时未见脱片，用的柠檬酸修复液，高压煮沸暴露抗原，时间为高压锅开始沸腾冒气后计时4min，40min冷却至室温后PBS冲洗2遍，3min/次 ，之后采用3%过氧化氢溶液灭活，37度下灭活30min，取出后PBS冲洗3次，5min/次，冲洗完了拿出来看就发现高达80%的脱片率，就算保存下来的组织切片也是大部分处于脱落边缘，滴加山羊血清封闭的时候组织切片会漂浮起来。目前同样条件下课题组小伙伴做其他的组织都没有问题，只有我这个一直在脱片。目前总结的可能问题有：

1.切片水平问题。可能跟我切片切的不好有关。

2.烤片问题，是不是应该采用低温长时间烤片的方法。

3.切片厚度问题，现在发现只有3um的能存活下来的最多，但也同样有很高的脱片率。

4.柠檬酸修复的时间问题，如果减少时间，有没有抗原暴露不完全的风险。

5.过氧化氢浓度问题。是不是使用的过氧化氢浓度过高。

有没有做过的大佬，求助求助求助，之前少量存活的片子做出来的结果还挺好的，现在就是脱片的问题解决不了，救救孩子吧。论坛里很多其余的脱片的帖子我也都看了，感觉没有几个能解决我这个问题的，求求了！！