求助|HPLC有机相比例降低，峰反而更分不开了怎么办？

求助，想要用液相把这三个峰分开，如下图，在同样流速和进样量的情况下，分别尝试了65%、60%、50%的乙腈，按道理应该是有机相比例越低分的越开，但是这个样品有机相比例越低反而越分不开了，之前从来没遇到过，求各位老师解答