干货 | 如何提高悬浮细胞感染效率？

悬浮细胞，是一类不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，通常为淋巴细胞等血液系统来源的细胞。具有“难培养”、“娇气”、“不易转染”等特点。

慢病毒作为细胞高效感染的首选工具，具备感染宿主范围广，能长期稳定表达且安全性高等优点，但是对于新手小白依然会遇到悬浮细胞感染效率低的问题。

那么该如何提高悬浮细胞感染效率呢？本篇共整理了七种方法，可以根据具体的实验情况进行选择~

1. 使用慢病毒浓缩试剂盒或者超速离心等方式，浓缩慢病毒液可提高慢病毒滴度；

2. 悬浮细胞多采用低速（1000g）离心感染（1h）方式，增加慢病毒与细胞接触面积或几率；

3. 考虑复感方式，即多次感染，感染24h后更换新的病毒液进行二次感染；

4. 使用传统的促感染试剂如Polybrene以增加细胞膜通透性，进而提高感染效率；

5. 1/2小体积感染，增大慢病毒与细胞接触几率；

6. MOI较高（>500），用24孔板半量培养基感染，即200ul病毒加150ul培养基，感染总体系是350ul，实现最大病毒用量；

7. 升级SFFV启动子，在血液来源细胞的中表达活性更高。