在细胞中将某基因敲除后，如果再继续在此基础上做过表达呢？

想请问一下各位大神么？有没有什么方法或者建议可以分享一下，我想找一个完全不表达我的目的基因的细胞系，但是目前没有，我有没有什么办法可以构建一个呢?目前想的是先在细胞里面用病毒把这个基因给敲掉，构建一个稳转株，然后再用这个稳转株做过表达，请问这个方法可行吗？稳转株还能转进质粒吗？还是说只能用病毒？求解答!