免疫治疗中的huPBMC人源化小鼠模型经验交流贴

外周血单核细胞（Peripheral blood mononuclear cell，PBMC)即外周血中具有单个核的细胞，主要由淋巴细胞（T或B细胞）、单核细胞、吞噬细胞、树突状细胞和其他少量细胞类型组成，是机体免疫应答功能的重要细胞组成。

免疫系统人源化小鼠模型是通过将人的造血细胞、淋巴细胞或组织植入免疫缺陷小鼠体内，从而使其重建人类免疫系统的小鼠模型。它们可有效地重建人类免疫系统，更好地模拟人体免疫特征，可以评价抗肿瘤药物的药效，以期筛选有效的抗肿瘤药物，从而为更多癌症患者带来治愈的希望。有效研究人类肿瘤和免疫系统之间的相互作用。

造模方案

| 实验动物：重度免疫缺陷小鼠-NAG

| 实验方案：

① 确定好细胞注射剂量后，按供应商提供材料复苏细胞，调整浓度进行细胞注射；

② 细胞置于4°冰袋传入设施进行注射（尾静脉注射或腹腔注射），接种后，观察小鼠状态；

| 实验评价体系：

01 GvHD观测

  huPBMC细胞接种后，每周两次GvHD观测，根据临床观察进行临床分数(体重、小鼠姿态、活动性、毛发、皮肤等方面)评定评分。

02 流式检测

流式检测  接种后每周检测一次流式，小鼠眼眶采血，利用流式细胞术检测mCD45及hCD45、hCD3、hCD4、hCD8细胞比例；接种当天定为D0，检测时间为：D7、D14、D21、D28、D35；

03 生存曲线

  记录死亡小鼠情况，绘制生存曲线图。

| 实验结果：

|  本研究评价huPBMC-NAG模型重建效果

01 根据实验终点D29天小鼠生存情况统计数据分析，huPBMC-donor1在NAG小鼠上中存活时间最长。

02 根据GvHD评分数据分析，huPBMC-donor1和huPBMC-donor2在NAG小鼠上中GvHD反应相对严重。

03 根据D29天小鼠外周血免疫细胞比例分析，huPBMC-donor1在NAG小鼠上中重建率较好。

| huPBMC人源化小鼠模型的优点和局限性

huPBMC转导的小鼠模型有各种优点，使其被广泛应用，包括：

01 huPBMC转导的小鼠是一种T细胞依赖性模型，大量免疫治疗都涉及T细胞调节/重靶向。

02 huPBMC人源化小鼠模型相对容易建立，无需专门培训或资本设备。

03 移植时间非常快。

04 同一免疫细胞供体可多次使用，以便进行纵向研究。

05 huPBMC转导的小鼠模型比其他人源化模型更具成本效益。

尽管该模型很受欢迎，但对该模型的使用仍存在一些犹豫。造成这种情况主要有两个原因：

① GvT的可能性很高，会阻止这一模型中的肿瘤生长。

② 该模型中GvHD的发生缩短了研究的时间。

这两个问题在一定程度上可以通过选择合适的huPBMC供体得到缓解，因为这两种效应的严重程度取决于供体。缓解GvT的供体选择可通过短期共培养试验进行，而缓解GvHD的供体选择需要使用所关注的肿瘤模型的异种移植物进行体内试验。

结论

huPBMC免疫系统人源化小鼠模型主要是将人类PBMC免疫细胞移植到重度免疫缺陷小鼠体内，模拟人类免疫系统，后选择合适的模型尽可能达到重建人类免疫微环境的目的，以模拟人体内的免疫应答以及疾病发生发展的过程。

#5月实验难题