求助交流：铜绿生物膜结晶紫染色实验，好多问题求教如何解决😭

本人最近在摸索做铜绿假单胞菌的生物膜的结晶紫染色实验，遇到几个问题：1.清洗浮游菌的时候是应该在96孔板加入pbs或生理盐水缓慢清洗，还是直接把板倒扣在一个装满生理盐水的盆里面荡洗，看到有人说在96孔板加液体的时候容易把生物膜洗掉，所以应该选择在盆里荡洗，但是我现在实验结果发现板子底部有好多结晶紫染色的絮状物，不知道是没洗干净的细菌还是产生的生物膜。而且板子底部一圈感觉结晶紫染色颜色特别深，不知道是不是我没洗干净结晶紫，现在造成我实验结果的数值都很大，见图一。2.假如用枪头去吸剩余菌液或者用枪头吸取pbs清洗小孔的时候，枪头能否碰到96孔板底部，清洗浮游菌的时候，怎样才能判断清洗干净了。3.图2每个孔里面气液交界处的小圈是否就是生物膜？4.固定液比如甲醇有没有必要加，我看有的文献加，有的文献没加。5.清洗的板子的时候能否用蒸馏水清洗。6.实验室酶标仪只有560nm的滤光片，能否用560nm的波长测定。有没有哪位大佬能帮我看看，不胜感激！