谈谈Western blot实验过程中不想犯的错误

本人在Western blot实验过程中，遇到过以下问题，分享给大家参考：

①在转膜过程中，用铲子将胶与玻璃板分开的时候，不小心把胶划破了，大家猜猜最终曝光结果如何？

②在转膜过程中，不是应该上下各放3层薄的滤纸嘛！但是，我当时大意了，下面放了3层，上面只放了1层（转膜完后才发现的），大家猜猜最终曝光结果如何？

③将大分子的目的蛋白（约110kd）与48kd的目的蛋白分子用10%分离胶一起跑，转膜参数：280mA，140min，大家猜猜小分子的目的蛋白跑过了没有？

欢迎大家一起来交流讨论。