重组质粒连接一直不成功!!!

质粒: PGEX-6P1(4984bp)
片段:393bp
Maker:5000
图1第一行为连接后转化DH5a然后挑菌培养的菌液PCR鉴定(24个样品),条带大小正确,选取最亮的四条(4/8/13/19)进行质粒提取,然后进行单酶切(BamHl)——连接时就是采用快速连接法,只进行了单酶切。酶切完跑PCR只有一条5000左右的条带,如图2,求求帮忙看看有什么解决办法😭😭


最后编辑于 2024-03-22 · 浏览 2486
质粒: PGEX-6P1(4984bp)
片段:393bp
Maker:5000
图1第一行为连接后转化DH5a然后挑菌培养的菌液PCR鉴定(24个样品),条带大小正确,选取最亮的四条(4/8/13/19)进行质粒提取,然后进行单酶切(BamHl)——连接时就是采用快速连接法,只进行了单酶切。酶切完跑PCR只有一条5000左右的条带,如图2,求求帮忙看看有什么解决办法😭😭
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