质粒构建问题

请问各位老师们一个困扰已久的问题,就是酶切后的载体和目的片段连接后,转化挑菌拿目的片段的引物pcr是阳性,但是用质粒的通用引物去pcr条带大小和普通的一样这是什么没连接成功吗?这种情况是为什么呢?理论上没连接上的目的片段不应该会游离存在吧。
最后编辑于 2024-03-18 · 浏览 2223
请问各位老师们一个困扰已久的问题,就是酶切后的载体和目的片段连接后,转化挑菌拿目的片段的引物pcr是阳性,但是用质粒的通用引物去pcr条带大小和普通的一样这是什么没连接成功吗?这种情况是为什么呢?理论上没连接上的目的片段不应该会游离存在吧。
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