dxy logo
首页丁香园病例库全部版块
搜索
登录

提取的RNA质量好不好怎么衡量

发布于 2024-03-09 · 浏览 1524 · IP 广东广东
这个帖子发布于 1 年零 53 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

260:280=1.8-2.0最优,260/230=2以上,越大越好。

A260:A230是分光光度计测量RNA溶液的浓度出现的数值,表示样品的纯度。

1、A260nm:核酸的吸收峰测,测RNA,DNA等的浓度用的。260nm是核酸分子吸收峰的波长,是核酸最高吸收峰的吸收波长,最佳测量值的范围为0.1至1.0。如果不在此范围,稀释或浓缩样品,使之在此范围内;如果吸光度小于0.05,检查是否存在操作因素(如移液不准确,样品内有悬浮物等)影响。

2、A230nm:测定碳源物质,如酚,糖类等浓度用的,是碳水化合物最高吸收峰的吸收波长,比值可进行核酸样品纯度评估。A230表示样品在230nm的波长处出现了吸收。在A230处出现吸收峰的原因是样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等。

3、280nm是蛋白质的吸收峰。

4、A260:A230可以表征样品的纯度,A260:A230的比值一般大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。

一般认为,260/280代表蛋白质污染的程度,260/230代表有机溶剂污染的程度。260/230偏小说明溶液中含有有机溶剂,理论上来说,会对酶的效率有影响。看你用什么东西提的了,用trizol的话,有时候260/230是会低点,关系不大。

最后编辑于 2024-03-09 · 浏览 1524

3 9 7

全部讨论0

默认最新
avatar
3
分享帖子
share-weibo分享到微博
share-weibo分享到微信
认证
返回顶部