反向遗传拯救带egfp的偏肺病毒,传不出来。
反向遗传构建了带egfp的偏肺病毒,转染24h.有很多荧光,不太亮,但是几乎视野里的bhk细胞都是。但是这些细胞就会变圆,48h会漂浮,这些带毒细胞接到下一代细胞里也不会长,荧光就没了。如果转染后,等5d,就会有正常形态的细胞里带很强的荧光,这种的就会慢慢长到附近的细胞里。感觉这种细胞是正常的带重组病毒的细胞,但是这种很少,所以也传不下去。
各位老师有没有解决办法,ps:转染前加的表达t7聚合酶的痘病毒。
反向遗传构建了带egfp的偏肺病毒,转染24h.有很多荧光,不太亮,但是几乎视野里的bhk细胞都是。但是这些细胞就会变圆,48h会漂浮,这些带毒细胞接到下一代细胞里也不会长,荧光就没了。如果转染后,等5d,就会有正常形态的细胞里带很强的荧光,这种的就会慢慢长到附近的细胞里。感觉这种细胞是正常的带重组病毒的细胞,但是这种很少,所以也传不下去。
各位老师有没有解决办法,ps:转染前加的表达t7聚合酶的痘病毒。