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(应该算经验贴?)细胞污染预防

发布于 2024-01-14 · 浏览 856 · 来自 Android · IP 湖南湖南
这个帖子发布于 1 年零 108 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

算一些细节点之类的……搞了这么长一段时间也算有一点点经验了|・ω・`)

紫外灯

除了工作台里要开紫外灯,细胞房(或者实验室)里边也要开,能起到减少污染可能性的效果。

os:紫外灯的那个小车大家应该都会用吧?它甚至能定时,省的人不记得照够没

注意无菌操作

比如复苏的时候不要整个冻存管扔进水里,要捏住盖子让下半部分泡在里边。还有一定要洗手戴手套穿实验服把手套扎到袖口里,我们实验室的实验服袖口是扣子扣的,我专门买了带松紧袖口的大褂做细胞。

新手小白的话可以看这个视频,我当时就是跟着这个视频学的,一些细节和操作要点都讲的蛮好。

【细胞培养基础 共5集 入门,细胞复苏,细胞传代,细胞冻存,无菌技术-哔哩哔哩】 https://b23.tv/Z56Hh51

多观察细胞,出现污染及时处理

通常是在高倍镜底下观察细胞状态,我在处理前后都会看。新手小白可能不太能分辨细胞是否污染,我从师兄那里学到一个办法,就是用手机相机的专业模式拍显微镜里的视野,然后放大去看细胞之间的间隙。怀疑污染了就大胆地提出来,论坛提问,问导师和师兄都可以。版块里应该也有专门讲解污染种类和处理方法的帖子,这里就不多讲了。

不要混用枪

之前一段时间养的细胞爆发了细菌污染,嗯……总之复苏了大约十支左右之后终于获得了一瓶看起来还算稳定干净的细胞。通过空白对照培养、污染检测试剂盒检测、提高抗生素联用浓度以及多次pbs洗涤细胞之后得出结论:有人把专供细胞实验的移液枪拿去他用,枪里边变成了污染源。我们实验室没有专门的细胞房,要坐电梯去别的楼层。为了方便起见,台子里专门腾了一个架子放细胞实验的移液枪,枪上边还贴了标签,但是别人不一定会注意到。

解决办法也简单,就是用医用酒精擦枪里头,再用无菌棉把里头擦干防止生锈;把枪的量程调小,比如5毫升的大枪我调成2.5毫升取两次,避免试剂有接触到枪里头的可能;以及抓住所有人员开一个实验室安全小会。最后重新复苏了一瓶并薅了专门的污染清除剂试用装,终于正常了,几乎浪费了我整整一个半月的时间(T ^ T)

试剂保存和使用

我们实验室配培养基是青链联用,长期放在4℃是会失效的,我一般会用灭菌离心管分装配好的双抗并在两周内用完,剩下的就冻在-20℃。

血清我是一次性分装一批,用灭菌的血清瓶或者蓝盖瓶分装,然后冻在-20℃。血清不要反复冻融,会影响质量,产生絮状沉淀(看起来会很像被污染了)

做完实验之后我会用封口膜把试剂的瓶口都包起来,这样保证长期不用的时候能够降低污染的风险。


目前大概有这么一些细节,后续如果有的话我也会更新的希望可以帮到才开始学细胞操作的小白


细胞版1月活动

最后编辑于 2024-01-14 · 浏览 856

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