生化|老生常谈 肌酐检测两种方法比较

苦味酸法

1.1 测定原理

肌酐有酮、烯醇式两种，在碱性介质中均以烯醇式肌酐形式存在，再与碱性苦味酸反应，产生一种红色的苦味酸肌酐复合 物，所形成的红色与肌酐浓度成正比，并可在波长500～ 520nm处测定。 

1.2 影响因素

a、假肌酐 

此法的主要缺点是特异性不高，血中的维生素C、丙酮酸、丙酮、葡萄糖、乙酰乙酸、果糖、蛋白质、氨基马尿酸 及很多其他化合物亦能与碱性苦味酸生成红色，这些不是肌酐而能起红色反应的物质统称为假肌酐。 

对于这些假肌酐的干扰，应用2点速率法来测定，即读取起始吸光度(A i)，再过120S读取终末吸光度 (Af)，计算时用Af—Ai=ZXA，通过2点速率法，有效地降低这些假肌酐带来的结果偏高的影响，假肌酐浓度过高时，还是会产生影响。

b、高浓度胆红素

高胆红素对测定结果也有很大影响，往往使结果偏低，尤其新生儿血清中的高胆红素，常会出现结果负值。这是因为胆红素在波长510nm处也有较强光吸收，影响Jaffe反应生成的红色复合物。

对于因高胆红素带来的负影响，一 般的苦味酸试剂中都加入了各种氧化物(包括过氧化物酶、 胆红素、氧化酶、高铁氰化钾等)，使胆红素被氧化成胆绿 素，来降低其干扰。 

c 、溶血

在红细胞、血清或血浆及尿液中假肌酐物质各约为60％、20％及50％，相当于大量的假肌酐存在于红细胞中，为避免结果的误差，血清样品应注意不能发生溶血。

2. 酶法

2.1 测定原理

肌酐在肌酐酶的催化下水解生成的肌酸，在肌酸酶的催化下肌酸水解产生肌氨酸和尿素。然而，肌氨酸在肌氨酸氧化酶的催化下氧化生成甘氨酸、甲醛和双氧水；最后偶联Trinder反应，比色测定肌酐在肌酐酶的催化下水解生成的肌酸，在肌酸酶的催化下肌酸水解产生肌氨酸和尿素。然而，肌氨酸在肌氨酸氧化酶的催化下氧化生成甘氨酸、甲醛和双氧水；最后偶联Trinder反应，比色测定。

2.1 影响因素

a、内源性肌酸

  目前均通过在R1试剂中除去。

b、胆红素

通过在试剂中加入亚铁氰化钾除去胆红素干扰，但是浓度过高还是会有影响。

c、抗坏血酸

抗坏血酸主要影响Trinder反应（后期推送一期汇总Trinder反应的项目），目前通过在体系中加入抗坏血酸氧化酶消除抗坏血酸的干扰。同样高浓度抗坏血酸依然会影响酶法测定，尤其肌酐浓度较低时更加明显。

d、药物

酶法易受药物影响，如强苯磺酸钙、酚磺乙胺等，如果肌酐酶法测定结果明显与临床不符合时，可考虑患者用药情况，进一步查找原因。

两种方法对比

苦味酸法价格便宜，但是容易受到假肌酐影响，且该试剂可能容易污染管路；酶法虽然价格偏贵，但是线性范围宽，抗干扰能力强，不易受到假肌酐和内源性肌酸影响，是目前主流方法，但是易受药物干扰，改问题还需引起重视。