wb 全膜？‖杂志要求全膜

现在越来越多的杂志需要全膜，以后也是一种趋势，在我之前的帖子里面也讲过，裁膜的不同方法对比，现在我来讲讲关于全膜的看法吧。

1 ，其实个人还是挺恨的，当初跑数据的时候，看了要求，以为跑了裁膜就可以了，轮到最近投稿子的时候发现，稍微好一点的杂志都需要全膜，以前跑的数据，只能投一般的期刊，所以还是很恨的。

2，全膜和裁膜对比的话，主要是一个材料节省问题，以我原来实验室为准，就用的美国的进口膜，一小块，就几十块钱，，本着节约的原则，所以一般选择裁膜，裁膜心得之前也有介绍。其次的话，表象来讲，杜绝了一些某某人的造假，有利自身的发展。

3:我之前也跑过全膜，条件的话，跟之前一样，我主要是看电流，检测转模和电泳环节，最大的区别就是把膜不裁，整张覆盖在胶体上，特别要注意的是，你要注意你的 marker 一定要清晰，有些实验室喜欢把 marker 稀释，稀释后 marker显影效果不好，影响整体的审稿，让人有怀疑。

操作的话，我一般是显影内参，按照之前的步骤方法，显影内参，显影以后，再来显影目的蛋白，使得目的蛋白和内参在同一项张膜上。

操作细节点如下

1:显完影响以后，用 tbst套洗一下，10 10 7，摇床 17-18，洗完以后，再孵目的蛋白的一抗，二抗体，这样可以保持目的蛋白和内参在同一张膜。

2 为啥推荐先内参和目的蛋白？

https://www.dxy.cn/bbs/newweb/pc/post/47352584?sf=1&sr=1

先看看这篇文章，因为你购买抗体问题，有些做的好。有些做的不好，如果你先目的蛋白，可能目的蛋白抗体过强的话，会影响内参的显影，目的蛋白在内参处也有显影，相互干涉。

内参，大多公司做的稳定，都是比较好的，目的蛋白可能差异很大。所以选择抗体。也要看看怎么选择。（之前有讲）

最佳就是先内参再目的蛋白，这是这个，当然是内参已经调平的情况，but

也不一定要调平，这是之前讲过的。

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