Raw264.7细胞碎片增多 增长缓慢 却不见菌？

刚复苏的时候细胞圆圆亮亮背景干净无杂质。

每两天穿一次，传了三代，第三代长到第四代的时候碎片增多，第五代的时候碎片更多，但培养基不浑浊，镜下没看到有黑点在动(让实验室其他人帮忙看了，说是背景不脏，但可以看出细胞状态不太好)。

背景随着时间推移会越来越脏，终于在第七代，培养基中浮动着很多黑色颗粒，高倍镜下看会动，所以我觉得是染菌了。

但不知道哪个环节染了菌，最近这两个月才出现这种情况。培养基、血清、双抗都用的是同一瓶，收集处理细胞时没用胰酶，是用细胞刮板(重复用，但每次用都会用酒精棉球擦擦，在红外高温仪烤一烤)，1000rpm, 25℃, 5min重悬。