WB求助!GAPDH和β-Actin都报不出来

我的样品是小鼠的十二指肠,蛋白提取是加了蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂。胶是预制胶,BSA封闭(目的蛋白是磷酸化的)。但是!GAPDH和β-Actin孵一抗或者曝光都是在相对的地方啥都没有!!!!!而且无论是孵那个内参,最后都是在25和58左右的位置有很明显很明显的条带,,,,没用tublin是因为目的条带50左右,,,,求助这到底是是咋子回事啊,,,,或者后续我应该怎么继续查出问题呢,,,

最后编辑于 2023-09-16 · 浏览 775
我的样品是小鼠的十二指肠,蛋白提取是加了蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂。胶是预制胶,BSA封闭(目的蛋白是磷酸化的)。但是!GAPDH和β-Actin孵一抗或者曝光都是在相对的地方啥都没有!!!!!而且无论是孵那个内参,最后都是在25和58左右的位置有很明显很明显的条带,,,,没用tublin是因为目的条带50左右,,,,求助这到底是是咋子回事啊,,,,或者后续我应该怎么继续查出问题呢,,,
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