药物浓度梯度稀释的计算

浓度梯度稀释是进行实验的一个重要方法,可以为我们带来便利,但是如何进行计算就很容易让人迷糊。浓度梯度稀释计算的核心就是物质的量相等
先来一个简单的不需要梯度稀释的
这里以铁死亡抑制剂Ferrostatin-1(fer-1)为例子,CAS为347174-05-4,分子量为262.35
首先我们取0.1mg的fer-1溶于0.5ml的DMSO里面,得到浓度为762uM的溶液
计算公式n=m/M,n是物质的量,m是质量,M是分子量。将0.1和262.35带入公式中得到浓度为762uM
现在我们的目的是将其放在体积为2.5ml中容器中,且浓度为2uM,该怎么配置?
根据C1V1=C2V2,C1=762uM,C2=2uM,V2=2.5ml,现在就是需要求V1,即需要从溶液中 取多少液体,放在2.5ml的液体后浓度能变为2uM,带入计算得到的结果会是需要6.562ul液体就够了,由于2.5ml相对于6.562ul来说非常大,所以直接将6.562ul的液体加进去就行了,这样液体的浓度就变为了2ul
接下来是浓度梯度稀释,1mg溶于1ml的DMSO里面,分子量为200
溶解后浓度是5mM,此时需要设一个浓度梯度分别为10uM、20uM、50uM的样品,每组各做两次,体积为2.5ml,问怎么配才能浓度达标?
核心公式依然是:C1V1=C2V2,梯度稀释就是从高浓度开始稀释,毕竟低浓度是无法稀释为高浓度的
C1=5mM,V1=?,C2=50/20/10,V2=2.5ml即需要从溶液中取多少液体,放在2.5ml的液体后浓度能变为50/20/10uM
首先根据计算,设置一个浓度为50uM、20uM、10uM的,需要溶液的体积分别是25uL、10uL、5uL,合计就是40ul,考虑到要做两次,所以一共是需要80ul的溶液,因为是要梯度稀释,所以先配成浓度为50uM的然后稀释到20uM最后到10uM
那么需要将80ul液体放入到多少体积的溶液里面浓度能够变为50uM呢?
根据C1V1=C2V2,C1=5mM V1=80ul,C2=50uM V2=?
根据计算得出V2=8ml,取80ul的液体到8ml的培养基,这样液体的浓度就变为了50uM,对于需要加入50uM的孔,由于浓度为50uM,不需要进行稀释,直接取2.5ml就可以了,由于做两次,所以一共取了5ml,此时余下3ml
对于20uM的孔,体积是2.5ml,根据公式C1V1=C2V2,带入50uM*V1=20uM*2.5ml,解的V1=1ml,因为溶液的总体积是2.5ml,因此需要补1.5ml的培养液,此时还剩下1ml液体,按照上述做法,各取0.5ml,补2ml液体即可达到浓度10uM