病理技术之固定液的选择详解(一)
这将是我在丁香园详细讲解实验动物相关技术(病理技术、各类实验动物解剖学、病理读片基础、动物造模、动物手术入路等)的第一篇小文章,因本人学识有限,文中难免遗漏或错误,欢迎各位同行前辈前来指正交流,欢迎各位同学向我咨询,因为解决问题的能力取决于遇到问题的多寡,你们也是我成长不可或缺的一份力量,共同学习,共同进步。
言归正传,从事病理技术的小伙伴肯定很清楚固定液对于病理的意义,因为一旦固定出了问题,那么后续所作的一切可能都将徒劳无功。固定:顾名思义,就是让离开身体后的组织保存其离体前的组织形态,按下组织的暂停键,让其既不工作,也不腐败,等着病理学家对其离体前的状态进行复盘,然后对其功过加以评定。
在固定过程中,病理最传统的固定液就是福尔马林(10%),这也是大家最熟悉的一种固定液,大家都知道福尔马林就是甲醛,但是10%的福尔马林是多少浓度的甲醛呢?
市面上的甲醛溶液一般为40%,也被称为福尔马林(100%),所以10%的福尔马林就是4%的甲醛溶液哦。
大家也许会听到多聚甲醛固定液,多聚甲醛或三聚甲醛是副醛,其实只是甲醛因放时间长了而产生的,严重的会出现白色沉淀并伴甲酸的产生,是甲醛变质的一种表现。(这里我想表达的就是,不用纠结甲醛是不是多聚甲醛,只要不产生沉淀都可以用)。
甲醛固定液的优点:可增加组织韧性、让组织尽可能的保持原状(组织收缩较小)、对于高尔基体等细胞器有较好的固定作用、渗透力较强(只要固定液与组织大小比例在5~10:1,固定效果就比较均一。
甲醛固定液的缺点:会溶液一些病理性结晶(如尿酸盐结晶),所以不能用于痛风相关的实验或组织;还有一些核蛋白它也固定不好,如果你做免疫组化或免疫荧光的标志物是核蛋白,那就尽量别用甲醛固定液,还有就是醛类固定液的通病,固定时间长了就会产生色素影像阅片,但可以用碱性的乙醇溶液消除。
10%的中性福尔马林,就是在10%的福尔马林的基础上改良过来的,其目前常用于免疫组化及分子病理学等更微观的病理学学科,因为其对某些抗原及遗传分子的保存优于10%的福尔马林。
注意:经醛类固定液固定的组织如果要做免疫组化/荧光,需要进行抗原修复(因为醛类固定液会使得抗原铰联封闭,使得抗体无法检出,出现假阴性)
其它固定液:且听下回分解
作者:徐明发(明苠)
最后编辑于 2023-08-27 · 浏览 2952