组学攻略|转录组多组学关联思路研究,实现高分SCI发表
多组学技术
多组学技术是近几年高分文章较多使用的一类研究手段,其主要内容包括对基因组学、转录组学、蛋白质组学、代谢组学和表观基因组学等多种类型的生物数据进行整合和分析;
转录组技术彻底改变了分子生物学领域,并导致了多个相关研究领域的出现,例如功能基因组学、系统生物学、单细胞转录组、癌症基因组学、免疫基因组学、表观基因组学、药物和环境基因组学,这些研究领域是相互关联的,亦可以相互整合进行联合分析,深入探讨生物样本差异性,转录组技术的进步继续塑造我们对生物系统及其复杂性的理解,以获得对生物系统全面了解。
转录组-蛋白质组整合
整合转录组和蛋白质组数据使研究人员能够研究基因表达和蛋白质丰度之间的关系。通过检查 mRNA 水平和蛋白质水平之间的相关性,可以识别转录后调节机制,例如蛋白质降解或翻译效率,该研究领域获得了以下一些研究进展:基因表达的验证;转录本和蛋白质丰度之间的差异;关键调控途径的识别;生物学见解和功能注释;揭示选择性剪接事件;表征细胞异质性。该研究方法已被广泛用于基因表达调控、生物标志物发现、蛋白质-蛋白质相互作用、基因和蛋白质的功能注释、系统生物学和网络分析、药物靶点识别和药物反应预测等领域,通过结合来自患病组织和健康组织的转录组学和蛋白质组学数据,研究人员可以识别参与疾病过程的差异表达基因和蛋白质,从而为新的治疗靶点或个性化医疗方法提供见解。
转录组-代谢组整合
这种整合方式能够探索基因表达如何影响代谢途径,通过将转录组数据与代谢组图谱关联起来,研究人员可以识别参与特定代谢过程的关键基因,并深入了解代谢网络的调节,在生命科学领域已取得以下一些研究进展:多组学数据整合;基于网络的分析;通路分析;代谢通量分析;时间序列分析;单细胞分析;功能注释和发现;已被用于疾病生物标志物发现、环境响应、代谢工程、植物生物学和农业、药物发现和开发等。转录组-代谢组整合方面的这些进展为基因-代谢物相互作用、代谢调节以及基因表达与细胞代谢之间的关系提供了宝贵的见解,它们增强了我们对复杂生物系统的理解,并有潜力推动疾病机制、个性化医疗和代谢工程等领域的发展。
转录组-表观基因组整合
表观遗传修饰,例如 DNA甲基化和组蛋白修饰,在基因调控中发挥着至关重要的作用,整合转录组和表观基因组数据可以揭示表观遗传修饰对基因表达的影响,例如识别与特定 DNA 甲基化模式相关的差异表达基因可以深入了解 DNA 甲基化对基因表达的调节。以下是转录组-表观基因组整合研究的一些研究进展:DNA 甲基化和基因表达;染色质可及性和基因表达;组蛋白修饰和基因表达;表观遗传调控网络;增强子-靶基因相互作用;单细胞表观基因组学和转录组学;长非编码RNA (lncRNA);已有研究领域包括发育和细胞分化、发现疾病的表观遗传驱动因素、非编码RNA的转录调控、环境对基因调控的影响等。通过构建连接基因、转录本、表观遗传标记和转录因子的集成网络,研究人员可以建模和分析细胞和疾病途径中涉及的调节回路和反馈回路。
转录组-非编码RNA整合
转录组-非编码RNA整合是指将转录组数据与非编码RNA(ncRNA)信息相结合,以更全面地了解ncRNA的基因表达调控和功能作用的过程。这种整合使研究人员能够研究蛋白质编码基因与各类 ncRNA 之间的相互作用,例如 microRNA (miRNA)、长非编码 RNA (lncRNA)、环状 RNA (circRNA) 等。近年来,上述几种转录组非编码RNA已成为基因调控和细胞过程中的关键参与者。以下是转录组非编码 RNA 整合研究中的一些显着进展:新型 ncRNA 的鉴定;ncRNA 表达谱分析;与 mRNA 的调控相互作用;ncRNA 的功能表征;ncRNA 之间的交叉对话;疾病关联和生物标志物发现;功能相互作用网络;这些网络整合了 ncRNA 表达、靶标 mRNA 相互作用和相关生物过程的数据,有助于阐明 ncRNA 的功能作用和调节机制。转录组非编码RNA整合研究的这些进展加深了我们对ncRNA多种功能和调控机制的理解。他们提供了有关 ncRNA 介导的基因调控、疾病机制和潜在治疗靶点的见解。转录组非编码 RNA 整合研究仍然是一个活跃的研究领域,有助于我们了解基因表达调控的复杂情况。
多组学技术的联合应用
生命科学领域的发展已经不满足于仅仅采用单一手段揭示疾病发展中的调控机制,越来越多的科研工作者已经着眼于多组学联合分析技术的开发与应用,整合和分析来自不同组学平台的多层分子信息,以提供生物系统的整体视图并揭示复杂的相互作用和调节机制,相关研究包括:
1.数据集成和相关性分析:多组学数据涉及来自不同组学平台的数据集,根据共享特征(例如基因、蛋白质、代谢物)对它们进行对齐来识别数据之间的关联,例如基因表达与蛋白质丰度或代谢物水平之间的相关性。
2.网络分析:基于网络的方法整合多组学数据来构建分子相互作用网络,例如基因调控网络或蛋白质-蛋白质相互作用网络。有助于识别生物过程或疾病状态中发挥重要作用的关键节点(基因、蛋白质)和模块。
3.通路分析和富集分析:通路分析涉及将组学数据映射到生物通路上,以识别与特定条件或实验因素相关的富集通路。
4.机器学习和预测建模:机器学习算法和统计建模技术可应用于集成多组学数据,以预测表型、对样本进行分类、识别生物标志物或揭示监管模式。
5.降维和可视化:降维技术,例如主成分分析(PCA)或t分布随机邻域嵌入(t-SNE),可用于降低多组学数据的复杂性,同时保留重要的生物学特征。6.因果推理和网络推理:因果推理方法旨在识别组学层之间的因果关系。7.纵向分析:纵向多组学分析涉及研究组学概况随时间的变化或对扰动的响应。组合的多组学分析使研究人员能够揭示不同分子层之间的关系,揭示调控机制,识别生物标志物,并全面了解生物系统。具体分析技术的选择取决于研究问题、可用数据以及所研究的生物系统的复杂性。
生物样本收集
>那么如何收集生物样本进行转录组学分析呢?
1.选择适当样本类型:可能包括组织、细胞、生物流体(例如血液或尿液)或其他生物材料。2.样品制备:可能涉及组织匀浆、细胞裂解或使用荧光激活细胞分选 (FACS) 或激光捕获显微切割 (LCM) 等技术分离特定细胞群。RNA 保存:收样过程尽量减少 RNA 降解,使用 RNA 稳定溶液或立即在液氮或干冰中速冻样品以保持 RNA 完整性。蛋白质保存:使用蛋白酶抑制剂并保持低温,减少蛋白水解活性并避免重复冻融循环。3.质量控制:对收集的样品进行质量控制检查,使用分光光度法(例如,测量吸光度比)或电泳(例如,RNA 完整性数,RIN)等方法评估 RNA 质量。对于蛋白质质量评估,可以采用 SDS-PAGE 或 Bradford 测定等技术。4.储存:RNA 样品通常储存在-80°C,而蛋白质样品可以储存在-20°C 或-80°C,具体取决于稳定性要求。
5.记录:准确记录如样本来源、采集时间及临床或实验信息,值得注意的是,具体方案和注意事项可能会根据具体的研究目标、样本类型和所采用分析方法而有所不同。因此,建议咨询文献、方案或该领域经验丰富的研究人员,为您的具体研究提供优化的样本采集方案。
主要分析技术
此外,转录组分析技术主要包括微阵列分析、RNA 测序 (RNA-Seq)、NanoString 技术、单细胞 RNA 测序 (scRNA-Seq)、基于液相色谱-质谱法 (LC-MS/MS)进行蛋白质组分析,使用生物信息学工具和数据库对已识别的基因和蛋白质的功能、途径和生物过程进行注释和解释、富集分析,以识别整合的转录组-蛋白质组数据中代表性过高的功能类别或途径、通过定量逆转录聚合酶链反应 (qRT-PCR)、蛋白质印迹(westenblot)或免疫组织化学/荧光(IHC/IF)等实验技术验证关键发现、生物学见解和假设生成、根据整合的转录组-蛋白质组分析生成假设,确定有助于观察到的基因表达和蛋白质丰度模式的潜在分子机制、调控网络或信号通路,使用集成数据指导进一步的实验研究或功能研究这些只是转录组分析检测技术的几个例子。每种方法都有其自身的优点和局限性,技术的选择取决于具体的研究问题、可用资源和所需的分辨率水平。研究人员经常结合多种技术来更全面地了解基因表达和调控并,以上都是可行的分析路径,具体应及时了解最新文献并咨询领域专家或生物信息学专家,以确保分析流程的正确实施。
持续分享,敬请点赞收藏关注哦~
也可私信我交流~




最后编辑于 2023-07-19 · 浏览 1525