3d细胞球冰冻切片（求指教）

细胞球pbs洗3x10min，10%苏木素染细胞球轮廓，pfa固定1min，15%蔗糖30min，30%蔗糖30min，用剪尖的200微枪头吸，待细胞球沉到枪头底，打到冷冻的oct胶上（会带有少量30%蔗糖溶液），oct胶包埋，急冻，切片10微米，3d球冰冻切片后出现大量空洞。