Masson染色原理及实验步骤、结果分析

Masson染色原理：

Masson 三色染色又称马松染色，是结缔组织染色中最经典的一种方法，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织，而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而，淡绿或苯胺蓝的分子量很大，因此 Masson 染色后肌纤维呈红色， 胶原纤维呈绿色或蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。

Masson染色流程：

①脱蜡至水：二甲苯Ⅰ5min，二甲苯Ⅱ5min，二甲苯Ⅲ5min，无水乙醇1min，95%乙醇1min，75%乙醇1min，自来水冲洗数秒；

②用配置好的Weigert铁苏木素染色液染色8分钟；

③酸性乙醇分化液分化15秒，水洗；

④Masson蓝化液返蓝5分钟，水洗。蒸馏水洗1分钟；

⑤丽春红品红染色液染色5分钟；

⑥弱酸工作液洗1分钟；

⑦磷钼酸溶液洗1分钟，弱酸工作液洗1分钟；

⑧苯胺蓝染色液染2分钟，弱酸洗1分钟；

⑨脱水透明：95%乙醇快速脱水2-3秒，无水乙醇脱水3次，每次5-10秒，二甲苯透明3次，每次1-2分钟，中性树胶封固；

染色结果：胶原纤维、黏液、软骨呈蓝色（如亮绿液染色为绿色），胞质、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色，胞核黑蓝色。

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