如何进行高量子核酸测序？
Q：如何进行高量子核酸测序？
A1：可以使用大规模平行签名测序、聚合酶克隆、454焦磷酸测序、离子半导体测序和DNA 纳米球测序等技术进行测序。
A2：可以利用solexa测序技术进行高量子核酸测序
Q：请教各位，我打算把db/db小鼠分为OGTT前和OGTT后两组做代谢组学，同时添加野生型对照。但现在db/db鼠有血糖有17的，有30的。对实验影响大吗
A1：你这差距比较大，对实验结果影响比较大。
A2：血糖高程度不一，对实验结果有影响。
A3：建议把血糖相似的大鼠列为一组，不要差距过大，影响实验判断
Q：培养含有kana和amp抗性DH5a有什么区别吗？这两种菌摇浑浊的时间不一样
A1：没有什么区别，就是要分别加对应的抗生素，浑浊时间主要跟挑菌的数量以及细菌活性有关。时间长短没有什么影响的
A2：这两种菌株在基本特性上没有太大的区别，但是在耐药性上有所不同。
至于摇浑浊的时间不同，这可能与菌株的生长速度有关。不同的菌株在同样的培养条件下，生长速度可能会有所不同，因此摇浑浊的时间也会随之不同。如果两种菌株在同样的培养条件下摇浑浊时间差异较大，可能是由于菌株本身的生长速度不同，或者培养条件存在一些微小的差异，比如菌液初始浓度、培养温度等。
A3：amp是β内酰胺类抗生素，其作用机理跟kana等抗生素不一样，它的内酰胺环会被质粒amp抗性基因表达的酶切割断裂，从而水解amp，使带抗性基因的细胞得以存活。所以两种抗生素的浑浊时间不同
A4：不是DH5a带抗性，是质粒带抗性，为了抑制不带这个抗性的细菌生长，在培基里面添加kana和amp。
所以培养两者没有区别，摇混浊的时间也没有区别:12-16h就行
Q：求助，效价测定，昨天晚上取得尾血，20点放进了37℃，今天早上6点才拿出来，这尾血还能用嘛
A1：全血应保存于4±2℃内，否则易凝固变性失活，影响效价结果。
A2：由于长时间暴露在37摄氏度下，尾血样本的可用性可能受到影响。这可能导致血液成分的变化，细菌的增殖以及其他细胞损伤。因此，建议您重新采集新鲜的尾血样本，以确保获得可靠的结果。
A3：37摄氏度血凝固变性了，效价测不准
Q：使用硫酸铵溶液提取胶原蛋白，调节溶液PH到7左右，使用固体硫酸铵盐析，水浴条件下进行，沉淀析出的很少或没有沉淀析出是什么原因? 换了饱和硫酸铵溶液进行盐析，也没有沉淀析出
A1：胶原蛋白的提取和析出可能受多种因素影响，以下是一些可能导致你没有得到期望沉淀的原因：
1. 样品源问题：可能是你的初始材料中胶原蛋白的含量较低，或者在提取过程中胶原蛋白已经被破坏或降解。
2. 盐析条件：硫酸铵的浓度对蛋白质的沉淀有很大影响。如果硫酸铵的浓度过高或过低，可能会影响胶原蛋白的析出。在这种情况下，可能需要调整硫酸铵的浓度。
3. pH和温度：胶原蛋白在一定的pH和温度范围内稳定。如果条件不合适，可能会影响到胶原蛋白的沉淀。你提到已经调节pH值到7，但是否也需要确保在整个过程中温度的稳定？
4. 提取和洗涤步骤：在胶原蛋白的提取过程中，可能需要经过多次的洗涤和离心步骤。如果这些步骤没有正确执行，可能会影响到胶原蛋白的提取和沉淀。
A2：主要原因在于：蛋白质不会溶解于酸，因为蛋白质分子个头太大，只能形成胶体。 加入高浓度性盐、加入有机溶剂、加入重金属、加入生物碱或酸类、热变性 少量盐(硫酸铵、硫酸钠等)能促进蛋白质溶解向蛋白质水溶液加入浓无机盐溶液使蛋白质溶解度降低而从溶液析出种作用叫做盐析. 盐析出蛋白质仍旧溶解水而影响原来蛋白质性质因此盐析逆过程。
A3：考虑是盐析ph不合适。
首先请查看操作步骤是否正确。
溶液pH值越接近蛋白的等电点，蛋白质越溶液沉淀。
盐析法是在中药水提液中，加入无机盐至一定浓度，或达饱和状态，可使某些成分在水中溶解度降低，从而与水溶性大的杂质分离。
丁香实验×赛默飞世尔科技——细胞实验专场提问活动开始啦！
活动期间，在丁香实验小程序上发布实验问题，还有有机会获得凌美笔、加湿器等好礼，快来看看都有哪些科研好物吧～
科研提问活动 · 细胞实验专场
活动时间：即日起至 6 月 16 日
主题：细胞实验
（请先发布提问，再填写收货信息）
怎么才能获得这些奖励呢？轻松 2 步就能拿奖品
Step 1：
👉 方式一：直接进入丁香实验小程序，点击底部【我要提问】，提出你的细胞问题，关联细胞提问活动，即可。
👉 方式二：戳下方链接进入丁香实验问答广场，点击底部的蓝色按钮【我要提问】输入问题，选择关联「细胞领域」的实验，点击提交。
（点击大图查看提问指导）
Step 2：
等待自己的提问发布后，戳下方链接填写地址👇，坐等奖品到家，就这么简单！
【细胞实验提问活动规则】
①提交真实的细胞实验问题，并且通过审核，在前台发布，视为成功参与
②按照提问通过审核的个数，发放对应奖励。
-前 70 位提问者：可获得丁香园鼻子纸 1 份
-前 25 位提交满 2 个问题：可获得加湿器 1 个
-前 5 位提交满 3 个问题：可获得凌美笔 1 支（先到先得，与加湿器不可兼得）。
备注：以上礼品不累加
③通过审核，符合奖励发放要求的，填写地址后 21 个工作日内统一邮寄
欢迎大家将自己的提问，分享至自己的实验室群、学习群等科研人聚集地，帮助有相同实验问题的同学，一同查看解决方案哦～
举办活动的初衷是为了帮助大家解决科研实验问题，如果系统识别到恶意刷榜挤占榜单，非科研实验问题，一律不予发货哦，请大家公平参与！
有专家大牛坐镇，还能领取惊喜好礼，从现在起到 6 月 16 日都可以参与活动哦，快快来参加吧👇
*说明：
1、活动最终解释权，归丁香实验所有
2、所有活动数据公平公正公开，任何违规操作刷榜行为，一经发现，将取消活动参与资格，并封禁账号，请诚信参与活动
3、活动奖励，将在 6 月 16 日活动结束后 21 天内，统一安排寄送，请耐心等待
4、此次活动奖励：前 70 位发布提问可获得丁香园鼻子纸 1 份；成功发布 2 个提问可获得加湿器 1 个；成功发布 3 个提问可获得凌美笔 1 支（先到先得，与加湿器不可兼得）。
最后编辑于 2023-06-09 · 浏览 706
