经验分享：轻松搞定流式胞内实验配色、破膜和补偿调节（含彩蛋福利哦）

流式细胞分析可以通过荧光抗体染色检测到细胞内的蛋白抗原，这不仅可以鉴别出来不同的细胞亚群，而且还能确定不同细胞的内部表征，从而加速免疫学的探索与发现。流式细胞内分析不仅实验步骤简单，而且同样可以实现在单细胞水平上对细胞膜上抗原、细胞内抗原、细胞信号磷酸化蛋白和 RNA 转录本同时进行检测。

为了更好的流式胞内实验结果，流式Flow-er经常会有疑问：

各种免疫细胞内有什么靶标？在核内还是胞浆？

哪里可以找到全面且经过验证的流式实验步骤？

流式胞内实验配色方案需要注意考虑哪些因素？

样本制备时，如何根据抗原特性和实验目的选择合适破膜液？

胞内检测靶标时，补偿调节有无通用原则？怎样调得更准？

如您刚好遇到以上问题，那不要错过赛默飞世尔科学技术专家联合丁香园于 6 月 1 日 14 点为大家带来《免疫征途，全面解析流式胞内实验难点》在线直播，在这里不仅有流式配色基础知识、流式胞内染色操作及易错点分析，而且师姐还会耐心解析实验中的固定破膜还有补偿调节！

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想要提高胞内染色成功率，我们需要注意哪些点呢？

● 在做流式配色之前，首先查阅文献中蛋白抗原在细胞上的表达强弱。

● 在配色时优先选择允许胞内染色的死活染料。

● 在配色时优先考虑不受固定破膜影响的串联染料。

● 根据不同的蛋白靶标，选择不同的固定破膜液和实验条件。

● 根据细胞类型和细胞因子，同样选择不同的刺激剂及相应实验条件。

● 设置充分的对照组，且所有对照组都应按照完整的实验步骤进行处理。

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