显影白膜看不到条带
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ba一块15%分离胶 一块12.5%分离胶
5%浓缩胶
电泳 loading buffer 20微 marker 3微
蛋白20微
蛋白浓度已经测过 统一在16mg/ml
90V跑到marker分离出来 溴酚蓝大概在分离胶
接着换140V跑到溴酚蓝到最下面
转膜100min 350V PVDF膜 已用甲醇活化
转膜出来的marker中下的位置 特别不清晰
封闭 脱脂奶粉 2g+TBST40g 2h
一抗 4度摇床过夜 目的蛋白新配的一抗 说明书是1:1000-1:5000 我配的1:5000
二抗 室温2h 1:10000
目的蛋白和内参都是一样 没有条带 全白 求大神解答
最后编辑于 2023-05-29 · 浏览 420
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