谷氨酸棒状杆菌基因敲除

目前在做谷棒的基因敲除,用的pk18mobsacb自杀质粒,第一轮筛选得到了正确的转化子,将正确的转化子挑至无抗的液体培养基隔夜培养后用无菌水稀释后涂至蔗糖平板,二轮转化子都没有条带。既没有敲除后的条带,也没有野生型的条带。验证了很多转化子都是如此。有人知道怎么解决吗?另外第一轮筛选的转化子在液体培养基中会有黄色的颗粒出现,刚开始以为是染菌了,做了多次都是这样。来个人救救孩子吧,迟迟找不到问题
最后编辑于 2023-05-22 · 浏览 1023
目前在做谷棒的基因敲除,用的pk18mobsacb自杀质粒,第一轮筛选得到了正确的转化子,将正确的转化子挑至无抗的液体培养基隔夜培养后用无菌水稀释后涂至蔗糖平板,二轮转化子都没有条带。既没有敲除后的条带,也没有野生型的条带。验证了很多转化子都是如此。有人知道怎么解决吗?另外第一轮筛选的转化子在液体培养基中会有黄色的颗粒出现,刚开始以为是染菌了,做了多次都是这样。来个人救救孩子吧,迟迟找不到问题
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