敲低敲除过表达总踩坑? 1 小时带你速速提效（内含福利）
「载体构建与表达」是进行基因功能研究的必备手段，面对眼花缭乱的载体list，选择困难症又犯了。问题不大，对症下药很重要~ 敲黑板！「载体构建与表达最全攻略」终于提上日程，线上讲座教你如何对症下药~
无论是过表达、敲低还是敲除；
不管是细胞系、原代细胞还是动物模型；
不用纠结表达载体启动子、荧光标记的选择；
不必担心化学转染、电转还是病毒转染……
针对具体需求，我们教你做出最优解！
丁香学术联合汉恒生物，邀请领域内资深技术专家，开展「载体构建与转染」线上讲座，赶快预约报名吧！从载体构建、转染试剂方法到动物模型载体的选择/应用，为大家的基因功能研究提供最全攻略。实用干货，不容错过，观看直播更有机会领取「科研顺利」冰箱贴。
本次线上直播，由具有8年行业经验、长期从事表观遗传学方面研究的杨燕老师主讲，干货满满。
不同载体的如何构建？
两个明确：一是明确实验体系；二是明确研究目的。
图1 基因功能研究的两种类型
实验体系
无非就是在体外（in vitro）和体内（in vivo）两种
研究目的
主要有三种手段 ①过表达、②敲低（减）表达、③敲除，剩余的就是检测这三种干预手段对功能表型的定量和定性影响。
载体选择要点：
不同载体也对应着不同的选择要点，比如：
l 过表达载体：重点关注启动子、标签和选择标记。其中选择标记主要目的是区分表达与非表达目的基因的细胞。
l 敲低（减、降）表达载体：启动子选择U6；标记选择通常跟过表达类似，尽量选Puromycin和ZsGreen
l 敲除载体：目前最常用的就是CRISPR-Cas9的基因敲除载体，该系统是个二元结构，需要在同一个细胞中一起表达Cas9和针对目的基因的sgRNA，优先推荐二合一型载体。
看到这里是不是对载体构建与转染有了一个初步的了解呢？在这场直播中我们还将教你：不同载体转染方法及病毒包装和感染的选择？常见细胞动物模型的载体选择？基于常见动物模型，具体的应用案例有哪些？
听了上面的介绍，是不是有些心动呢，赶快报名参加吧！
最后编辑于 2023-03-20 · 浏览 1617
