癫痫造模问题 | 如何确定癫痫大鼠造模成功呀？
Q：求助求助各位朋友！我用的是氯化锂＋匹罗卡品造模，成年雄性 SD 鼠，但是目前我们课题组没有脑电图相关器材，我想知道怎么才能确定我的大鼠造模成功呀？仅靠造模时的 Racine 评分可以莫？需要每天对大鼠进行不剪短 24h 观察嘛？
A1：通过观察大鼠发作情况，根据Racine分级标准，若无发作或发作未达到 Ⅳ 级，则每隔 30min 腹腔注射 PIL0 10mg/(kg·次),直至出现癫痫持续状态为止。达到 IV-V 级发作，持续 30min 以上可认为是癫持续状态，Ⅳ 级以上发作并存活者可作为成功的癫痫持续状态模型。
A2：造模成功的判断通常需要综合多种指标，包括行为学评分、神经组织学检查、电生理检查等。其中，Racine 评分是评估大鼠癫痫发作严重程度的常用指标，但并不能作为唯一的评价标准。因此，建议你在观察大鼠行为和进行电生理检查时，同时结合 Racine评分等多种指标来判断大鼠是否成功造模。
关于观察大鼠的行为，建议你每天观察大鼠的一些基本行为，如进食、饮水、活动等，并记录下来，以判断是否出现异常行为。同时，还可以对大鼠进行癫痫发作诱发试验，观察其是否出现典型的癫痫发作表现。
Q：博来霉素法构建肺纤维化动物模型？
A1：【造模方法】
小鼠：选用体重 18～20g 的雄性昆明小鼠。氯胺酮(100mg/2ml)腹腔注射(10mg/100g)，将实验动物麻醉后仰卧，纵行切开皮肤，钝性分离暴露气管，用 4 号针头刺入气管，尽量接近气管分叉处，将 0.05ml 博来霉素缓慢滴入(博来霉素每支 8mg，用前以生理盐水配制成 0.2％ 药液)，立即将动物直立旋转，使药液在肺内均匀分布，然后缝合皮肤，局部乙醇消毒防止感染。同样，也可选用雌性 BLAB/C 鼠，将小鼠腹腔注射水合氯醛麻醉后固定于操作台，以动物喉镜压下小鼠舌根暴露声门，雾化器从声门插入气管并雾化注入博来霉素溶液 100μl(5mg/kg)。
【模型特点】小鼠使用博来霉素后 15 天，病变弥漫，但以肺泡间隔、血管和小气管周围显著。病变处肺泡壁增厚，毛细血管扩张，肺泡腔变小，其中充满大量的中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞等炎症细胞。在气管、血管周围及近胸膜处出现以中性粒细胞、单核细胞为主的炎症细胞浸润，呈 3 级肺泡炎性改变。30 天后病变弥漫，病变处肺泡壁增厚，肺泡间隔增宽。在气管和血管周围及近胸膜处肺组织可见以单核细胞和淋巴细胞为主的炎症细胞浸润，胸膜增厚，并可见较明显的成纤维细胞和胶原纤维的增生和集聚。主要呈 1 级纤维化改变。
经典的复制肺纤维化小鼠模型方法是气管内滴入博来霉素溶液。气管内滴入或雾化博来霉素均能引起明显的肺组织损伤与肺纤维化改变。单次气管内滴入博来霉素即可引起明显的肺纤维化，但病灶分布欠均匀，不能准确地模拟人类原发性肺纤维化病变的弥漫性分布。气管内雾化给药方式能使博来霉素更均匀地分布于肺内，纤维化改变更弥散，更接近人类肺纤维化改变。气管内雾化博来霉素溶液不需穿刺气管，减少了动物的损伤与痛苦，可作为复制肺纤维化小鼠模型的优选方案。
A2：博来霉素法（Bleomycin）可以用于构建肺纤维化动物模型，常用于小鼠和大鼠模型的制备。
制备模型的方法一般是将博来霉素通过气管直接喷入动物的肺部，使其诱导肺组织发生纤维化变化。具体操作步骤如下：
将博来霉素溶解于生理盐水或者 PBS 中，制备成一定浓度的药液。
使用麻醉剂使小鼠或大鼠进入昏迷状态，然后将药液通过气管插管注入动物的肺部。
使动物保持直立姿势，以便药物充分接触肺组织表面。
麻醉剂逐渐消退后，将动物恢复到正常状态，维持其日常生活和饮食。
在一定时间后（通常为 1-4 周），通过解剖或者其他方式采集肺组织样本，进行病理学和分子学的检测。
需要注意的是，博来霉素是一种强烈的致纤维化剂，其使用需要谨慎，应该严格按照安全操作规范进行操作，以免对操作人员和动物造成不良影响。
Q：请问大家构建好肿瘤模型后什么时候开始给药呢？我有 20 只裸鼠，本来想分成三个组，每组 6 只，但是皮下接种肿瘤两个星期后，只有 10 只裸鼠的体积在 100mm^3，而且这 10 只最大的 534，最小的 101，我都不知道怎么分组了，请问大家是怎么做的啊？一只达到 100mm^3 就给一只的药，还是等到够分组再给啊？
A1：建议分组后再给，这样可以排除环境的差异，先等足够分组再给药
A2：构建好肿瘤模型后一般第二天开始给药。
A3：通常情况下，在进行肿瘤药物研究时，药物的给药时间应该在肿瘤体积达到一定大小后，以确保肿瘤有足够的负荷去反应药物。不过，最佳的给药时间会根据具体实验的设计、目的和药物的性质而有所不同。
对于你的情况，由于你只有 10 只裸鼠的肿瘤体积达到了 100mm^3，可能很难分成三个完全相同的组，而且最大和最小的差距较大。如果你想分成三组，建议等到剩下的裸鼠的肿瘤体积也达到 100mm^3，再根据体积大小将它们分成三组。
如果你希望能够更早地给药，则可以在达到肿瘤体积 100mm^3 的裸鼠中随机选择一部分开始给药，其余的则作为对照组。不过，需要注意的是，这种做法可能会导致药物反应的不确定性，因为肿瘤体积较小的裸鼠可能对药物反应较弱，而肿瘤体积较大的裸鼠可能对药物反应较强。
总的来说，给药时间的选择应该根据具体实验的设计和目的进行调整。
Q：请教各位前辈，关于大鼠行为学实验，由于实验室并不能配备齐全所有种类的行为学设备，而我的课题需要进行四五种行为学实验，包括 Morris 水迷宫、Y迷宫、旷场试验、强迫游泳实验等。而在我检索过程中发现这些实验都需要使用摄影设备和数据分析软件，那能否自行搭建现场，利用手机进行摄影，利用 PS、剪映等视频编辑软件来进行分析呢？
A1：可以自己搭建，搭建的时候注意环境的建立标准就可以。
A2：可以自行搭建现场（但是需要严格按照操作规范来进行），利用手机进行摄影（需要用像素高的手机），利用 PS、煎映等视频编辑软件来进行分析。
A3：对于大鼠行为学实验，摄影设备和数据分析软件是非常重要的工具，因为它们可以帮助您记录和分析实验结果。在实验室设备不齐全的情况下，您可以尝试以下几种方法：
自行搭建现场并利用手机进行摄影：您可以尝试在实验室中自行搭建实验现场，并利用手机摄影记录实验过程。然而，需要注意的是，手机摄影可能存在一些局限性，如摄像头的分辨率、帧率等，这可能会影响您的数据质量。因此，建议您在选择摄影设备时要注意设备的质量和性能。
利用 PS、剪映等视频编辑软件进行分析：您可以使用这些软件对您的视频数据进行编辑和分析。这些软件通常具有基本的视频剪辑和分析功能，但是，它们可能不够精确和专业化。因此，建议您在选择软件时要注意软件的性能和功能，以确保您可以得到准确的实验结果。
Q：测小鼠的肝功 ALT、AST 这些指标，实验室一直都是在取血的前一晚禁食不禁水，这样处理有问题吗？
A1：需要的，排除喝水后对酶代谢的影响。
A2：测生化指标最好前一晚禁水。避免造成结果有误。
A3：在测量小鼠的肝功指标 ALT 和 AST 时，禁食不禁水也是常规操作，因为饮食和水分摄入可能会影响这些指标的测量结果。
禁食不禁水的时间一般为 12 小时，这种处理可以减少消化系统对肝脏的影响，并使小鼠体内代谢产物的浓度更加稳定。不过，如果禁食不禁水时间过长，可能会导致小鼠脱水和营养不良，影响实验结果的准确性和小鼠的健康。
另外，禁食不禁水处理的选择也取决于实验的目的和具体情况。在一些研究中，可能需要考虑小鼠的饮食或水分摄入对研究结果的影响，因此需要进行不同的处理。因此，具体的实验操作需要根据实验的具体要求和标准来决定。
总之，禁食不禁水是一种常见的实验操作，可以减少实验结果的变异性，但禁食不禁水的时间需要合理控制，以避免对小鼠的健康产生不良影响，并保证实验结果的准确性。同时，需要根据实验的目的和具体情况进行选择。
