急求！ELISA样本稀释问题，为什么样本稀释不同倍数测得OD值却差不多，有的还高？
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想问一下各位前辈，第一次做ELISA，测定小鼠血清中几个炎症因子的含量，试剂盒原理是双抗体夹心法，六个标准品是试剂盒自带的，样本用试剂盒自带的样本稀释液稀释
第一次做的TNF-a，同一样本稀释50.100.200三个倍数，标准曲线R2=0.9669，测出的OD值都在标准品最大浓度OD值的一半，但是三组不同稀释浓度的OD值却是差不多的。
第二次做了IL-1B，样本分别稀释了5.10.25.50倍，这次的标准曲线R2=0.993，各稀释倍数的OD值都接近于标准品中位浓度的OD值，且跟第一次一样的情况，OD值区别不大，但更奇怪的是稀释倍数高的OD值反而更高了……
理论上来说，稀释倍数越高，OD值应该是越低的，而且按稀释倍数换算后测得的样本浓度应该也是相近的，为什么稀释倍数差这么多，OD值却变化不大呢
这样的话，我该怎样确定稀释倍数呢，求各位大神解答
最后编辑于 2023-02-23 · 浏览 3450
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