ImageJ 半定量分析Western blot条带教程
1. 图片类型转换:打开图片后Image→Type→8-bit。


注意这里,如果本来是8bit就不用再改;如果是原来已经invert过了,后面步骤4.5就可以省略,勿重复invert。
2. 降背景:Process→ Subtract Background,在弹出的对话框中,填上50,并勾选 Light background,点击OK。


3. 设参数:Analyze →Set Measurements。在对话框中勾选Area、Mean gray value、Min& max gray value、Integrated density、Display label。


4. 设单位:Analyze →Set Scale。在对话框“Unit of length ”后面填上“pixels”(一般默认是inches),注意,其他的参数保持与下图一致。


5. 黑白反转:Edit →Invert。

6. 选择测量区域:选择菜单栏下的不规则圆形工具或者矩形工具,将圆圈或者矩形工具手动调节圈住第一条带。

7. 测量条带:点击菜单栏Analyze下拉出现的measurement,即可得出测量结果(IntDen所在列数值即为条带灰度值)。也可以点击快捷键(英文状态下的键盘M或者中文状态下Ctrl + M)
8. 继续测量:重复步骤6和7,移动选框至下一条带,直至所有条带被测量完成。

注意,这时需要保持每个条带的选框大小一致(Area)。当鼠标显示为白色箭头时,长按鼠标左键移动选框,可保持选框大小不变。然后IntDen这列数据即为每个条带的平均灰度值。
9. 导出结果:点击Results中的File按钮,点击Save As。导出结果为Excel格式。


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最后编辑于 2023-10-09 · 浏览 2931