PCR技术看这里!让你一篇吃透PCR,看完必拿捏!
想当年曾听施一公教授吐槽自家博后:“他刚进我实验室的时候,连PCR都不会!”确实,对每个生物狗来说,PCR是基本技能,因为生物实验中用到PCR的地方实在太多了
PCR 的 发 展
从 PCR 技术发明至今已过去38年,而 PCR 技术目前已发展到了第三代。在过去的38年里,PCR 技术为生命科学的发展做出了不可磨灭的贡献。
一代 PCR

通常我们说的第一代 PCR 技术就是最初的 PCR,它采用普通 PCR 扩增仪来对靶基因进行扩增,然后采用琼脂糖凝胶电泳对产物进行分析,只能用于做定性分析。
二代 PCR

第二代 PCR 就是荧光定量 PCR 技术(Real-Time PCR),也叫做 qPCR,详见《荧光定量 PCR 那些事儿》。荧光定量 PCR 通过在反应体系中加入能够指示反映进程的荧光探针,通过荧光信号的积累来监测扩增产物的积累,通过荧光曲线来判断结果,并可以借助 Cq 值和标准曲线来做定量分析。
三代 PCR

第三代 PCR 技术叫做数字 PCR(Digital PCR, dPCR, Dig-PCR),这是一种全新的 PCR 检测方式,能对核酸进行检测和定量,它能够直接计数目标分子而不依赖任何校准物,即可确定低至单拷贝的待检靶分子的绝对数目。
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最后编辑于 2022-10-14 · 浏览 2941