求助,高GC含量pcr
最近在做基因敲入,需要p出上下游同源臂,但是模板gc含量很高。75%以上,设计的引物gc含量也很高,tm也达到了65,试了很多方法,包括takara的gc buffer,或者其他酶加dmso,降落pcr也做了,但是效果并不好,会出现非特异条带,目的条带在380bp左右,maker依次为2000,1000 700 500 250 100

最后编辑于 2022-10-06 · 浏览 3336
最近在做基因敲入,需要p出上下游同源臂,但是模板gc含量很高。75%以上,设计的引物gc含量也很高,tm也达到了65,试了很多方法,包括takara的gc buffer,或者其他酶加dmso,降落pcr也做了,但是效果并不好,会出现非特异条带,目的条带在380bp左右,maker依次为2000,1000 700 500 250 100
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