引物设计分享|Thermo Oligo Perfect|秒杀大多引物设计软件的网页引物设计工具

Thermo旗下的一个网页引物设计工具，因为算法连接数据库分析，比起非数据库分析的线下引物设计软件来讲，设计出来的引物特异性高（不需要再去NCBI blast），并且操作简单、快捷。所以我很推荐用这个线上引物设计工具，没有安装引物设计工具/或电脑装不上的同学们，收藏起来，以后跟着步骤学起来吧。

1.打开Thermo Fisher 官网Thermo Fisher Scientific - CN。

2.官网页面窗口引导栏中“应用和技术”隐藏栏找到“寡核苷酸、引物、探针和基因”点进去；

3.选择“寡核苷酸工具和应用程序中心”的“OligoPerfect”超链接；

4.跳出引导界面，直接点“设计您的引物”，登录页面登录，就可以了。也可以直接从官网页面里的“支持”“寡核苷酸工具和应用程序中心”进入；

5.登录完之后，自动跳转；

6.第一个为qPCR引物设计入口；第二个可以作为探针设计入口；第三个过表达等引物设计入口；这里主要讲qPCR引物设计，大家可以结合第二个入口设计探针法qPCR引物；（从NCBI中导入FASTA序列，这个网站局限就在这里，一定要FASTA序列，但是这也是它链接数据库的代码，这样可以省去再去NCBI blast的步骤。）

7.从NCBI中下载或复制FASTA序列文件；

8.粘贴FASTA序列进去之后，点击“design primers”，就设计好了；

如果觉得设计的太长，可以返回上一个界面，点“SHOW PARAMETERS”进行参数修改。这个网站设计引物很方便，但注意一定要粘贴“FASTA”序列，才能设计成功。