Wb经验贴‖最后一篇显影篇幅

写到这里了大概都已经结束了，有些细枝末节的点，我看看帖子能想起来就补在下面。

一：显影液的区别，怎么选显影液？

显影液大体分为三个，plus. Star. Moon，也就是加强，星星，月亮。他们三的显影厉害程度依次升高，一般经验性的选择中阶star，而在一些抗体中，比如武汉三鹰的ldha，我觉的好强，显影，所以我在一二抗配置稀释我也会加大比例，显影的时候我会选择plus，因为太黑了，太亮了。

:ps一般而言我们，我们条带跑出来背景干净，一眼能看出差别的，就很nice，我跑的原则就是弱的若隐若现。（后面显影显条带的时候也是这样调）

而一些蛋白纯度低的，就用月亮。

反正一般而言（对于我来说）：

经验性用星星，跑出来不是若隐若现，太强了（黑亮，像那个actin），就洗洗再用plus，太弱了就用月亮。

洗的话就是用tbst洗，555三次，17-18振幅。

二：显影液怎么使用？

显影液分ab液体，1：1混合，不要见光不要暴露于空气过长时间，所以处理的时候，注意以下细节（或者是说我的处理点还有我觉得可以的点）：

1：我是15ml的管子，外面包了一层纸，作为混合ab的容器，器皿。加完a液立马盖盖子，加完b液立马盖盖子，然后上下一颠倒混合就很均匀了。

2：膜怎么蘸料（显影液怎么加？）

我看的方式有这么几种

1）有人把显影液配的多，然后整个泡里面，外面的盒子是用锡纸包着（用啥包无所谓哈哈哈）

2）有人问用1ml枪头直接射在膜上面

3）我是改良版的每张膜泡在tbst上，tbst的厚度大概是浸没的基础上2mm-3mm，总共tbst大概有个3ml左右，每 3ml左右tbst加1ml的显影液。

三种方法，都显影前泡个30s-1min中左右。然后去显影？

有人怀疑时间短了？不，已经够了，后续曝光的时候：10秒每张，曝光十张就好了！

3：操作环境，尽量避光（关关灯呀之类的）

4：其他的没啥好说的了。

还是上图吧