masson染色步骤及注意事项

染色步骤：

1. 切片常规脱蜡至水（冰冻切片省略这步）

2. 重铬酸钾染液滴染（浸染）过夜，自来水稍洗。

3. 铁苏木素液A与铁苏木素液B按1：1混合后滴染5-10min，流水稍洗。

4. 1%盐酸酒精分化数秒，至细胞核呈灰黑色，背景无色，流水冲洗数分钟。

5. 丽春红酸性品红染液滴染5-10min，倾去染液，流水稍冲洗(此时组织呈鲜红色，若红色较浅，可适当延长染色时间或在50℃烘箱中染色)。

6. 稍甩干，磷钼酸分化液（分化1-2分钟，倾去E，不水洗。

7. 苯胺蓝染液滴染30-60s，倾去染液，不水洗，连续2缸1%冰醋酸分化，每缸5s。

8. 2缸酒精脱水1min，二甲苯透明后，滴加中性树胶封片剂封片。

结果判读：胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色，肌纤维，纤维素和红细胞呈红色。

注意事项：

⦁ 染色过程中不可出现干片

⦁ 铁苏木素a和b必须临用前混合，不能提前混合，否则易氧化失去染色力。

⦁ 磷钼酸处理时最好在镜下观察，肌纤维为红色，胶原纤维为淡红色时停止。

⦁ 苯胺蓝染色时间不易过长，过长易造成蓝色过深。

⦁ 根据不同组织着色快慢不同，可以适当调整丽春红酸性品红染液染色时间。