【讨论】内皮祖细胞专业讨论区

园子里养内皮祖细胞的战友现在已经越来越多了，但居然还没有一张专门用于讨论的帖子，见的最多的帖子也就是
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=76&id=4166020&sty=1&tpg=1&age=0
再此对参与此帖讨论的战友表示感谢，让我们学到了不少东西。
但对没有专门的内皮祖细胞讨论帖在此表示遗憾，所以本人不才开此一帖，希望版主能审查通过，更希望各位战友多多参与，共同撑起内皮祖细胞这一片天。:P
参与此讨论区的可以是有关内皮祖细胞的实验培养方法、心得体会、最新研究进展情况等，在培养过程中遇到什么疑问的也可以在此区跟帖，希望版主和各位战友多多给予支持:D
见笑，本人就先开个头吧。
内皮祖细胞的研究自1997年Asahara报道发现外周血中存在内皮祖细胞，并于1999年报道了来源于骨髓的经标记EPCs参与了子宫内膜、移植癌、下肢缺血、心肌梗塞等生理和病理的血管新生以来，有关这方面的 研究就在国内外如火如荼的开展起来。目前关于内皮祖细胞的研究从细胞水平、分子水平、动物体内实验、以及小规模的临床试验报道都有见到。
而对于做这方面的研究的人来说，养好细胞是一个关键。目前关于如何培养不同来源的内皮祖细胞以及如何进行鉴定，因各实验室培养方法各异，所以尚未统一。国外培养方法差别较大，比较有趣的就是 这2篇文章
http://www.dxy.cn/bbs/user/download/4680495/EPC1.pdf 24小时后洗掉未贴壁细胞和碎片，然后七天内每天换液一次，之后每隔一天换液一次直至传代。
http://www.dxy.cn/bbs/user/download/4680523/EPC2.pdf 48小时后搜集未贴壁细胞重新接种，然后每隔3天换液一次，七天后计数细胞集落数。
看了真不知道怎么养出来的细胞才是真正的内皮祖细胞。不过，国内养的方法都差别还不是很大吧，做的较多是外周血 和脐血来源的内皮祖细胞培养，采用密度梯度离心法分离单个核细胞后，再进行诱导培养获得。骨髓来源的国内报道不多，而且是局限于动物。本人最近在做脐血来源的内皮祖细胞培养，存在一个困惑就是搜集到的细胞量不够多。（40ml脐血大概只能搜集到1.7×107）不知大家这方面有什么体会没有，多交流下。