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RT-PCR、Western blot 和 ELISA 三者有啥区别呀?

医疗行业从业者 · 发布于 2022-07-11 · IP 浙江浙江
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这个帖子发布于 3 年零 133 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

之前一直都不明白 RT-PCR、Western blot 和 ELISA 三者的区别,最近看到了一个总结觉得还不错,赶来分享给大家呀~


一、目的

虽然两者都是通过抗原抗体反应对蛋白质进行检测,WB主要还是定性,Elisa可以定性,也可以定量。

WB所检测的一般是抗原,而Elisa抗原抗体都可以检测。

WB所检测的抗原可以知道其分子量的大小,或是否是多聚体、降解产物等,一句话,WB可以确定所用抗体是与那种蛋白起作用的;而Elisa无能为力,一锅端了。

二、模式

WB是(抗原-抗体-二抗酶)模式进行检测;Elisa模式有多种,如(抗原-抗体-二抗酶)、(抗原-抗体-抗原酶)、(抗抗体-抗体-抗原酶)、(抗体-抗原-抗体酶)、(抗抗体-抗体-抗原-抗体酶)等等很多很多。

三、抗体的适用性

WB所适用的一抗一般是线性位点的,ELISA线性或构象型抗体都可以使用。从另一个意义上讲,WB可以做抗体是线性位点还是构象型位点的补充判定,而Elisa不行。

四、灵敏度

一般Elisa的灵敏度要远高于WB,这从一般酶标记物的使用浓度或待检样品的稀释度上就可以看出。

五、可操作性

WB一次处理量就是一块胶版,10-20个样品最多了。Elisa一块96孔板一次可以处理96个样本,可以设置多个复孔、对照、梯度样等来提高检测的可信度。

WB操作常见的非特异性条带,膜本底差,显色不好等等缺点在Elisa上表现得要好得多。

六、商品化度

WB不管怎样,都要自己先做电泳。而Elisa有很多成熟的商品化 试剂 盒了,只要不怕花钱,检测要方便快捷得多。


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