胰酶消化过久会提高细胞的凋亡率吗？

一般说来，胰酶消化时间过长，对细胞会造成损伤，影响其活力，甚至细胞破碎。如果胰酶消化时间过长，就要注意在加入胰酶消化前先用PBS冲洗一下培养瓶，这样可提高胰酶消化能力，缩短消化时间;另外，可以在配制胰酶时加入EDTA，这样就更易消化细胞。

如果细胞长久不贴壁，可试用下面的方法：

1、将细胞接种到培养后，静置12小时或者更长时间后再取出观察是否贴壁，因为频繁地移到培养瓶影响细胞的贴壁，但很多人都喜欢在分瓶后1小时观察细胞贴壁情况，其实这样会影响细胞贴壁；

2、检查你的胰酶中是否加入了EDTA，如果有，那么就要重新配制没有EDTA的胰酶。

用胰酶消化的时间长段，与酶的活性、是否加入了EDTA、消化前血清洗得是否干净以及细胞本身的特性都有很大的关系。

在消化细胞的时候，用的是0.25%的胰酶+0.02%EDTA。加入EDTA后，可以缩短胰酶的消化时间，以减少对细胞的损伤。

胰酶消化时间过长的话，会影响细胞的活力，使细胞贴壁受到很大的影响，甚至直接导致细胞死亡。对于在细胞膜表面的蛋白，如果用胰酶消化时间过长，也可能在一定程度上，影响这些蛋白的检测结果。

如果觉得细胞消化的时间太长的话，可以尝试如下方法：

1、如果没有加EDTA，建议加入EDTA;

2、如果胰酶浓度较低，可以提高浓度至0.25%;

3、可以将胰酶先放入细胞培养箱，使其温度提高至37℃，再进行消化，可以大增加胰酶的消化能力。