流式细胞术检测CD4、CD8
CD4和CD8细胞
白细胞又称为免疫细胞,包含淋巴细胞和吞噬细胞等,其中淋巴细胞是免疫系统的基本成分。
淋巴细胞包含T淋巴细胞(CD3+)、B淋巴细胞(CD3-CD19+)、NK细胞(CD3-CD16+CD56+),其中T淋巴细胞是淋巴细胞的主要组成部分。
T淋巴细胞即胸腺依赖淋巴细胞,简称T细胞。
接下来讲一下最基础的通过流式细胞术检测小鼠外周血中CD4+和CD8+含量。
实验步骤:
1、取100ul全血加入30ul肝素钠溶液处理成抗凝血;
2、取抗凝血100ul加入FITC anti-mouse CD3 Antibody(2ul)、APC anti-mouse CD4 Antibody(1ul)、PerCP/C yanine5.5 anti-mouse CD8b.2 Antibody(1ul);
3、避光孵育30min;
4、加入红细胞裂解液2ml,轻轻吹打混匀,室温避光反应10min;以1500rpm离心5min,弃上清;
5、加2ml PBS混匀后,1500rpm离心5min,弃上清;
6、细胞沉淀加入500ul PBS重悬后上流式仪检测。
结果展示:

临床意义:
1、CD3下降常见于以下几种情况:
①恶性肿瘤;
②自身免疫性疾病,如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等;
③先天性免疫缺陷病,如艾滋病;
④接受化疗、放疗或者使用肾上腺皮质激素等免疫抑制剂。
2、CD3上升则常见于重症肌无力、慢性活动性肝炎等。
3、CD4淋巴细胞减少常见于恶性肿瘤、艾滋病、遗传性免疫缺陷病、应用免疫抑制剂的患者。
4、CD8淋巴细胞增多常见于自身免疫病,如慢性活动性肝炎、SLE、肿瘤及病毒感染等。
发布于 2022-05-20 14:10
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2743