实验｜视网膜血管铺片HE染色
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请问各位老师有人做过这个实验吗，我有问题求助，谢谢大家。
我的实验步骤
1. 取小鼠眼球 放4%多聚甲醛中固定24h 4度
2. 显微镜下剥离视网膜，24孔板500ul ddH2O摇床清洗室温过夜，1h换一次水（5-6次）
3. 吸除水，加入3%胰蛋白酶，37°消化1.5h，期间没有摇晃（问题来了，视网膜消化完，碎成两三瓣，这是消化过了吗？）
4. 显微镜下剥离限制性膜，但是根本看不清血管，只能看见白色的组织，一碰就碎。只能摇床ddH2O清洗，移液枪一吸就碎。最后的结果就是视网膜全部碎成渣。实验中断。
请问大家问题可能出在哪呢？固定不够吗？需要固定液心脏灌注吗？消化时间太长了吗？消化完可不可以不用镊子剥离，直接摇床蒸馏水清洗呢？谢谢大家
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 3584
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