PBMC中T细胞的激活

请问想要激活PBMC中的T淋巴细胞，然后添加免疫抑制剂处理，用CD3/28，PHA，ConA哪种激活比较好，推荐浓度是多少？这种激活会导致CD4/CD8 T淋巴细胞亚群的变化吗，因为后续想证明免疫抑制剂的免疫抑制作用，另外可以直接作用于PBMC吗还是要提前分离T淋巴细胞，请各位指教。