如果买来的Aβ是单体可以直接用DMSO寡聚吗
如果买来的Aβ是单体可以直接用DMSO寡聚吗
体外制备 Aβ1 - 42 寡聚体的方法,将 HFIP 置于冰 上,在 Aβ1 - 42 粉末中加入充足的冷却的 HFIP ( HFIP 是一种高腐蚀性、挥发性的试剂,操作时注 意安全) ,使终浓度为 1 mmol /L。充分用液体吹打 瓶壁,使 Aβ1 - 42粉末彻底溶解。室温孵育 60 min, 保持封闭。溶液必须是无色、清亮的。若是出现黄 色、浑浊液体或是悬浮的肽,证明质量不好,不要使 用。接着将其放在冰上静置 5 ~ 10 min 后转移并 等量分装至各个离心管中,盖子打开,在通风橱内 室温下过夜,使 HFIP 挥发完全。第 2 天观察挥发情 况,使用真空浓缩离心机使 HFIP 完全蒸发,最终只 可有清晰透明的薄膜留在离心管底部,不应为白色 或是厚实的块状物。将干燥的肽膜存于 - 80 ℃ 冰 箱保存,使用时将其放在冰上,用 DMSO 充分溶解, 终浓度为 5 mmol /L。接着用不含酚红的 F12 培养 基来 稀 释,为得到最好的效果,最 好 不 要 超 过 100 μmol /L的浓度。4 ℃孵育 24 h 后,14 000 g 冰 冻高速离心机离心 10 min,上清液即为寡聚体。
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2457